產(chǎn)品名稱：corning康寧 G418硫酸鹽，液體

產(chǎn)品貨號(hào)：30-234-CR

產(chǎn)品規(guī)格：10 mL

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常用篩選抗生素之G418

康寧的細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品組合包括一系列抗生素和抗真菌試劑產(chǎn) 品，其中一些抗生素會(huì)改變關(guān)鍵酶的活性，還有一些則是通過(guò) 改變細(xì)胞通透性發(fā)揮作用。這些產(chǎn)品可以滿足從殺菌到抑菌的 多種需求，如預(yù)防性控制細(xì)菌、真菌、支原體或酵母菌造成的 污染，為細(xì)胞培養(yǎng)提供適合的環(huán)境；也可用于微生物/哺乳動(dòng)物 細(xì)胞的篩選性培養(yǎng)。 G418（又稱Geneticin，遺傳霉素）是一種氨基糖苷類抗生素， 氨基糖苷類藥物與核糖體不可逆地結(jié)合，并通過(guò)破壞其校對(duì)能 力導(dǎo)致翻譯提前終止或錯(cuò)譯，從而抑制蛋白質(zhì)合成，阻止敏感 細(xì)胞的生長(zhǎng)。 G418對(duì)需氧和兼性需氧革蘭氏陰性桿菌、一些革蘭氏陽(yáng)性菌以 及真核細(xì)胞均具有氨基糖 苷類毒性。因而常被用于 篩選表達(dá)氨基糖苷類修飾 酶的細(xì)胞株。

G418的結(jié)構(gòu)中包含雙堿基 環(huán)醇和2-脫氧鏈霉胺，它 們通過(guò)糖苷鍵與氨基糖連 接。G418的結(jié)構(gòu)獨(dú)·特性源 于 C-6 位置的羥基功能而 不是氨基功能。這種差異使其能與80S核糖體復(fù)合物特異性結(jié)合，與其他非特異性結(jié)合真 核細(xì)胞核糖體的氨基糖苷類藥物相比，G418 抑制真核細(xì)胞蛋白 合成的作用更強(qiáng)。 而氨基糖苷類修飾酶，即氨基糖苷類磷酸轉(zhuǎn)移酶（APH），可 共價(jià)修飾抗生素（如G418）的氨基或羥基功能，削弱藥物-核 糖體的相互作用，從而妨礙G418發(fā)揮功能，即表現(xiàn)為耐藥的效 果。  當(dāng)新霉·素抗性基因被成功轉(zhuǎn)染進(jìn)真核細(xì)胞后，可獲得抗性產(chǎn)物 氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá)，使細(xì)胞獲得抗性而能在含有 G418的選擇性培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。因此G418作為一種有效的真核 翻譯抑制劑，被廣泛用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染新霉·素抗性基因（表達(dá)氨基 糖苷類修飾酶）的真核細(xì)胞的選擇和維持。推薦常用的篩選濃 度范圍為 100-800 μg/mL。 抗生素的有效殺傷濃度會(huì)因細(xì)胞類型、培養(yǎng)基、生長(zhǎng)條件、細(xì) 胞密度、細(xì)胞的代謝速率和所處的細(xì)胞周期而異。為了克服這 些變量并確保成功，理想情況下，應(yīng)通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定每個(gè)特定的 培養(yǎng)系統(tǒng)的工作濃度，以及引入新變量時(shí)的工作濃度。工作濃 度可以通過(guò)繪制劑量反應(yīng)曲線來(lái)確定。當(dāng)在新的細(xì)胞系統(tǒng)中使 用G418硫酸鹽時(shí)，建議繪制全劑量曲線，并且在每次使用新批 次的G418硫酸鹽時(shí)，重制劑量曲線。

產(chǎn)品名稱：corning康寧 G418硫酸鹽，液體

產(chǎn)品貨號(hào)：30-234-CR

產(chǎn)品規(guī)格：10 mL

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